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PCR实验室设计及建设要求

发布时间:2018-08-31

  PCR实验指的是基因扩增实验,其特点是能将微量的DNA大幅增加,是分子生物学研究和实验的常规方法,PCR实验室广泛应用于生物学各个领域,例如:乙型肝炎,禽疫病、艾滋病检测,癌基因的检测和诊断,个体识别,DNA指纹,亲子鉴定及法医物证等等。SLD中检实验室技术就PCR实验室设计和建设要求逐一给大家解释:

  一、PCR实验室布局

  1、PCR实验室原则上分为:①试剂准备区;②样品制备区;③扩增区;④扩增产物分析区,共四个单独的工作区域。并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间,工作区与缓冲间宜安装连锁装置。

  2、不同功能的工作区应是分隔独立的,各工作区有明显的标志,不能直通,如果紧密连接,需安装物品传递窗。

  ①试剂准备区和样品制备区为扩增前区;

  ② 扩增区和扩增产物分析区为为扩增后区,即从:试剂准备区——样品制备区——PCR扩增室——产物分析室,不得逆向流动。

  3、的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。

  4、各工作区的顶部应该安装紫外灯,紫外灯波长一般为254mm,配置要求为每20㎡一支40W的紫外灯。

  二、实验室设计各区功能及主要设备

  1、实验室设计试剂准备区:

  ① 实验室设计主要进行试剂的制备,分装和主反应混合液的制备。实验室设计试剂盒用于样品制作的材料应直接运送至该区域。

  ② 实验室设计试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的试剂。

  ③ 实验室设计本区主要设备有冰箱,天平,离心机,加样器,振荡器等。

  ④ 实验室设计本区对气流压力的控制,并没有严格的要求,一般为+10Pa。

  2、实验室设计样品制备区:

  ① 实验室设计主要进行样品的保存,核酸提取,贮存及其加入至扩增反应管和测定DNA的合成。

  ② 实验室设计本区主要设备有冰箱,生物安全柜,离心机,加样器,振荡器等。

  ③ 本区的压力梯度要求为:实验室设计相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染,压力一般设计为+10Pa。

  3、实验室设计扩增区:

  ① 实验室设计主要进行DNA扩增项目。

  ② 实验室设计已制备的DNA模板(来自样品制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂准备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。

  ③ 实验室设计本区主要设备有:冰箱,加样器,离心机,扩增仪等。

  ④ 本区的压力梯度要求为:实验室设计相对于邻近区域为负压,以避免气溶从本区漏出,压力一般设计为-25Pa。

  4、 扩增产物分析区:

  ① 主要进行扩增产物的测定。

  ② 本区主要设备有加样器,洗板机、酶标仪和水浴箱等。

  ③ 本区的压力梯度的要求为:相对于邻近区域为负压,以避免扩增产物从本区扩散至其它区域,压力一般设计为-25Pa。

  三、PCR实验室设计通风系统及压力控制

  ① 实验室设计各区域之间应具备单间的实验工艺流、气流、物流与人流,形成单向流程的保护屏障。避免实验室之间的相互干扰,也防止气溶胶扩散对实验过程造成污染。

  ② PCR实验室设计并没有严格的净化要求,实验室设计但是为避免各个实验区域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式,严格控制送风、排风的比例,实验室设计以保证整个实验区的压力要求。

  四、PCR实验室设计装饰

  ① 实验室设计围护结构应牢固,气密性好;

  ② 实验室设计所有阴阳角宜采用圆弧过度;

  ③ 实验室设计墙体内壁光洁,不积尘、易清洗、易消毒、耐腐蚀;

  ④ 实验室设计地面使用环氧树脂自流坪或PVC卷材,材料应满足光洁、耐腐蚀、无缝隙、无渗漏的基本要求。

  五、PCR实验室设计注意事项

  1、实验室设计区域大小设置:样品制备区要放置生物安全柜和低温冰箱,空间应大一些。而试剂准备区,扩增区,扩增产物分析区,空间可以相对小一些。

  2、实验室设计应急装置配备:试剂准备区,样品制备区应设紧急洗眼器,实验室设计以保证操作人员的安全。

  编辑; 实验室设计                                 http://www.91jinxian.com/tongfenggui/